印度尼西亚南苏拉威西岛望加锡开始养殖观赏海洋鱼类，以保护珊瑚礁ECO免受破坏性捕捞，并补充当地社区的收入。与圈养繁殖条件相关的压力可能会增加鱼类对疾病的脆弱性。

  Amphiprion percula 显示出临床症状，例如通常与淋巴囊虫疾病相关的白斑和疣。对DNA聚合酶基因的一部分进行测序证实了小丑鱼组织中淋巴囊虫病病毒的身份，该病毒与天堂鱼的LCDV非常相似。

  环境可持续的渔业资源的前景至关重要，例如水产养殖，尽管与观赏淡水鱼相比，OMS育种知之甚少。在圈养繁殖的100个OMS物种中，只有21个物种被认为具有商业利润。

  集约化养殖条件相关的压力因素，如水质、处理、放养密度和营养，使鱼类不易感染致病病原体。从高度污染的沿海水域收集的鱼类含有过多的病原体，可能会引起圈养疾病。

  寄生虫，细菌，病毒和真菌病原体是观赏鱼生产中的疾病病原体。淋巴囊虫病病毒能够最终靠疾病威胁观赏鱼，并由于鱼类的疣状外观而损失利润。研究重点是LCDV，因为没有针对病毒感染的具有成本效益的治疗方法。

  在高密度养殖环境中，LCDV可以从在病毒感染中幸存下来的鱼类横向传播，并且仍然是该疾病的携带者。早期发现LCDV对于通过识别和清除作为感染宿主的携带者来最大限度地减少疾病传播和传播非常重要。

  病原体检测的一种方法是环介导的等温扩增（LAMP）测定，它采用DNA聚合酶，4-6引物，自动循环链置换和等温孵育温度的DNA扩增技术。

  与传统和实时荧光定量 PCR 不同，具有比色检测功能的 LAMP 检测无需昂贵的实验室设备，例如热循环仪、凝胶电泳和凝胶记录系统。LAMP测定与传统PCR相比相对敏感，反应时间更短，提供快速和敏感的疾病诊断。

  kuda），橙色小丑鱼，以及睡衣红衣鱼。在2015年至2017年Takalar孵化场的圈养繁殖期间，其中一些物种表现出各种感染。

  . percula中的一种新的LCDV菌株，并通过开发常规PCR和LAMP测定来评估圈养OMS中的病毒流行率。

  通过对DNA聚合酶基因的一部分进行测序来鉴定LCDV，并确定其与其他LCDV菌株的系统发育关系。在极易发生传染病的养殖条件下，早期和特异性检测无法治疗的病毒因子对于确保鱼类健康具备极其重大意义。

  新的小丑鱼亲鱼（F0）于2015年1月从Balai Laut Ambon引入育种设施，孵化场从印度尼西亚不同地点的混合亲鱼中繁殖，包括Balai Laut Ambon和Balai Laut Takalar。在成年小丑鱼中观察到肿瘤、疣和白斑，包括幼虫和亲鱼中的慢性鳍腐病。

  检疫程序于2015年2017月启动;然而，小丑鱼的海洋IC，鳍腐，呼吸急促和喇叭形盖膜随之而来。还使用光学显微镜筛查鱼是不是真的存在外部寄生虫或组织刮擦中的细菌。

  将临床感染的小丑鱼的肾脏/脾脏无菌接种到用过滤无菌海水制备的脑心脏输液琼脂（BHIA）上;使用Qiagen血液和组织试剂盒处理在BHIA上生长的显性代表性菌落以进行基因组DNA提取。

  研究期间，Takalar 孵化场安装了连续的水流系统。进入的海水通过加长的进水管泵送;通过一系列机械过滤器过滤;储存在50吨的水库中;在水流入养殖池之前，经过砂过滤、微滤，最后进入紫外线灭菌器系统。

  在筛查LCDV DNA的72条小丑鱼中，有症状和明显健康的鱼都是LCDV PCR阳性，在45种不健康的鱼中，20.0%是LCDV阳性，而在24条健康鱼中，有20条鱼或8.3%是LCDV阳性。

  小丑鱼LCDV与在海洋鱼类物种中发现的其他淋巴孢子虫病毒一起被放置在进化枝I中，如DNA聚合酶基因生成的系统发育树。

  印度尼西亚小丑鱼LCDV与中国天堂鱼LCDV关系最密切，在核苷酸和推断氨基酸水平上序列相似度高。

  引起疾病的病原体常见于自然环境中，一旦引入压力大的水产养殖条件，就会出现一些明显的异常问题。在我们的研究中，在圈养小丑鱼和其他OMS中观察到的各种感染主要与细菌和原生动物有关。

  虽然与这些微生物相关的疾病能够最终靠各种治疗方案来管理，但由于缺乏针对病毒制剂的有效化学治疗，对抗病毒感染具有挑战性。出于这个原因，研究的重点是评估在OMS圈养繁殖中遇到的病毒感染。

  小丑鱼表现出白点、疣和肿瘤，导致对淋巴囊虫病病毒 （LCDV） 的推定鉴定。使用部分DNA聚合酶基因的基因测序将病毒鉴定为LCDV，与天堂鱼LCDV的DNA聚合酶的序列相似度（氨基酸水平）为91.2%。

  要进一步调查以确认小丑鱼的LCDV菌株是否与天堂鱼中的LCDV不同。目前缺乏基于DNA聚合酶和/或其他基因标记的关于包括LCDV的虹膜病毒物种分化的临界值的具体指南。

  尽管从印度尼西亚小丑鱼中鉴定出的LCDV可能属于一个新物种，但需要全基因组测序和电子显微镜来准确分类病毒。使用DNA聚合酶基因的一部分解决了核心目标。

  即描述新LCDV菌株在育种设施中的小丑鱼和其他OMS中的身份和流行率。此外，部分DNA聚合酶基因充分建立了小丑鱼LCDV与其他已知LCDV菌株的遗传关系。

  繁殖设施中的另一个OMS对LCDV呈阴性，表明小丑鱼LCDV品系的宿主范围是有限的。需要进一步调查以确认小丑鱼LCDV菌株是否对小丑鱼具有宿主特异性。

  虽然没有从亲鱼卵中检测到LCDV DNA，但LCDV能够最终靠携带者亲本的卵表面垂直传播。我们的研究设计不包括对LCDV传播的评估。Takalar孵化场的小丑鱼繁殖方案在某些时期内没有将后代与亲本分离。

  鱼与鱼之间的水平传播通常是通过直接摄入水中发现的受污染的食物颗粒和粪便而发生的。喂给OMS的mysids对LCDV DNA呈阴性，至少从LCDV PCR检查的mysid群体来看。

  由于在小丑鱼中检测到不同生命阶段和健康情况的LCDV，因此评估孵化场中患病和明显健康的鱼类中的病毒存在被认为是相关的。证明了非致死性采样和LCDV PCR检测鳍夹和鳍腐病和淋巴细胞病变的皮肤刮擦成功检测LCDV的存在或不存在。

  LCDV PCR筛查为可疑人群中携带病毒的鱼类的流行情况提供了信息。清除LCDV阳性的鱼可能有助于减少养殖水箱中可能的病毒库。

  在孵化场爆发疾病后，在没有或存在LCDV的情况下，小丑鱼幼鱼和成鱼的产卵量减少和猝死随之而来。LCDV爆发时发生的细菌感染和寄生虫，加上2015年和2016年水温升高以及高浓度的氨和硝酸盐，可能会引起小丑鱼应激导致死亡。

  第一次疾病爆发发生在新亲鱼到来之后，这可能从受污染的海洋环境中引入了病毒和其他病原体。有趣的是，与F0明显健康的成年人（37%）相比，F5野生亲鱼的LCDV阳性百分比（1.14%）更高。

  LAMP测定在有症状和无症状鱼类的LCDV检测中显示出与传统PCR相当的灵敏度，表明即使在携带状态下，两种方法也可以充分检测LCDV。

  开发的PCR和LAMP检测将有利于在OMS育种的关键阶段检测LCDV：（1）新亲鱼及其后代的LCDV筛查;对其他健康鱼类的感染鱼类进行检疫;（2）筛查各种OMS，活食和其他潜在的LCDV宿主。

  尽管检疫和疾病筛查可能有助于最大限度地减少LCDV在鱼类种群中的传播，但在OMS种群中完全消除病毒是不可行的。良好的饲养有助于减少导致昂贵鱼类种群和后代损失的疾病暴发。

  更重要的是，含有富集藻类和轮虫的新饲养制度改善了鱼类营养。鱼类护理的这些变化显着减少了疣和白斑的发展，并降低了与细菌感染相关的死亡率。

  侧重于物种特异性生物学的研究能够在一定程度上帮助改善亲鱼，幼虫产量和营养。发现育种复杂性较低的OMS育种技术能与学术研究合作。迄今为止，小丑鱼被认为是该行业交易最丰富的物种。

  但可持续采购的 OMS 支持环境友好型做法并补充沿海社区的生计。与由于破坏性捕捞做法和过度捕捞而被认为对环境有害的野生收获相比，OMS育种的好处必须在更广泛的背景下加以平衡。

  【2】Assefa A，Abunna F （2018）水产养殖中维持鱼类健康：预防和控制鱼类传染病的流行病学方法综述。兽医国际 2018：1–10.

  【3】Austin B （2011） 细菌鱼类病原体的分类学。兽医研究42（1）：20。